高效毛细管电泳色谱仪在药学中的应用涂布胶辊
时间：2022/07/14 17:18:32 编辑：
高效毛细管电泳色谱仪在药学中的应用
高效毛细管电泳色谱仪（HPCE）是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离，是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展，使分析科学从微升级进入到纳升级。近年来，HPCE在药物分析应用中发展迅速，正越来越受到重视。一、中药及中药复方制剂的分析：1、应用范围：生物碱、黄酮、各种苷类、香豆素类和酚酸类等。2、分离模式：分离模式以CZE和MECC为主。（1）生物碱：生物碱是植物中一类重要的化学成分，在植物中分布较广。生物碱能解离带正电荷，可采用CZE分离模式。植物中的生物碱结构极为相似，有时pKa差值很小，除可根据pKa值不同选择缓冲液pH值外，还可适当增加添加剂，以增加选择性和分离度。（2）冬虫夏草：采用HPCE分析冬虫夏草，可获得44个电泳谱峰，很易区别蛹虫草、人工培养品、伪品和次品等。而采用HPLC只能获得十几个色谱峰。3、特点：HPCE用于中药分析虽然处于起步阶段，但分析冬虫夏草、六味地黄丸、银杏叶、人参、甘草等数十种中药材和中成药的实验证明，采用HPCE分析中药具有强大的优势。（1）柱效高，分析快速，进样体积小。（2）抗污染能力强，样品前处理简单甚至于不需前处理，适用于脏样品分析。（3）分析运行成本低。（4）水溶性样品的指纹特征性强，如中药汤剂和注射剂等分析。（5）应用面广。除可分析小分子酸、碱、盐和中性分子外，还可分析生物大分子（核酸、多肽和蛋白质等）和手性分子等。二、化学药物及其复方制剂的分析：手性对映体的存在是自然界的普遍现象，在有机化学、药物化学和生物化学等领域尤其突出。以药物为例，大约有50%的药物是手性的。临床应用的手性药物，除天然药物和半合成药物外，人工合成的含手性药物仍以外消旋体供药为主。1、外消旋体药物中各对映体的药理活性通常差异较大，可归纳为四类：（1）治疗作用完整依赖于一种异构体。（2）药理作用的差别不大，定性和定量都相近。（3）药理作用的特性相似，但反应强度有明显差别。（4）药理和（或）毒理作用存在质的差别。对映体的药效学差别对合理用药和新药开发产生重要影响，纯异构体可发展成为副作用较小的新药。2、对映体的拆分方法：对映体的拆分方法有非色谱法和色谱法。非色谱法是根据对映体的物理化学性质差别分离。色谱法已成为对映体拆分的一个主要工具，包括GC、HPLC和HPCE等所有色谱方法。（1）HPLC拆分法：引入不对称中心。1）间接法：与手性试剂在柱前衍生，形成一非对映异构体对。2）直接法：使用手性固定相和手性流动相拆分的方法。（2）手性HPCE与手性HPLC相比的优点：1）避免了HPLC需要将大量手性试剂加入流动相中和使用昂贵的特殊固定相的缺点。2）HPCE的毛细管价格较低，溶剂仅需几毫升，样品量极微。3）HPCE在有效度、精密度、检测下限、线性范围和重现性等方面均已达到甚至超过HPLC。3、药物拆分的主要用途：（1）生物体液中药物对映体的分离分析，各对映体的药物动力学和体内处置过程分析。（2）制备药物对映体，给实验室和临床提供纯的对映体，以进行单个对映体的药理学评价。（3）药物对映体的质量控制分析。三、HPCE新进展：1、应用研究：蛋白质分离、DNA测序、手性分离和单细胞分析等。2、新方法的建立：建立了阵列毛细管电泳、亲和毛细管电泳和芯片毛细管电泳等新方法。3、联用技术：HPLC－HPCE、HPCE－MS和HPCE－NMR等。